Nachweisverfahren für Aptamermetaboliten in Biofluiden; Analytik von Aptamer-Abbauprodukten in humanem Urin mittels NMR-Spektroskopie

Die Charakterisierung von Stoffwechselmetaboliten eines Wirkstoffs ist eine wichtige Bedingung im Zulassungsprozess neuer Medikamente. Eine junge Klasse neuer Wirkstoffe mit stark zunehmender Bedeutung sind synthesechemisch hergestellte, einzelsträngige DNA-Sequenzen, die sogenannten Aptamere. Für diese Substanzklasse und ihre Abbauprodukte existieren bisher keine etablierten Nachweisverfahren für Urin- und Blutproben. Diese Verfahren am Beispiel des Thrombin-bindenden Aptamers zu entwickeln, ist das Ziel dieses Antrags. Als analytische Methode soll die NMR-Spektroskopie verwendet werden, deren Vorteil darin besteht, nur wenig durch die Vielzahl der Begleitkomponenten in den humanen Proben gestört zu werden. Auf der anderen Seite müssen Maßnahmen getroffen werden, die der geringeren Empfindlichkeit der Methode entgegenwirken. Die Probengewinnung, -präparation, -anreicherung, die Mechanismen der Metabolisierung, die Bestimmung von Nachweisgrenzen, das Erstellen von Spektrenbibliotheken und die Evaluierung der Messmethodik sind Gegenstand des Antrages der Kooperationspartner.