Characterization of the Dnmt2 methyltransferase homolog pmt1 from Schizosaccharomyces pombe

Die Methylierung von Cytosin-Basen in der DNA ist eine Modifikation, die von vielen Organismen zur Regulierung der Genexpression genutzt wird. Die Spalthefe Schizosaccharomyces pombe besitzt ein Homolog zur Familie der Dnmt2-Methyltransferasen, Pmt1, hat jedoch keine detektierbare DNA-Methylierung. Wir haben gezeigt, dass Pmt1 eine tRNA Methyltransferase sowohl in vitro wie auch in vivo ist. Erstaunlicherweise zeigt die in vivo-Aktivität eine starke Abhängigkeit von Nährstoffen, und diese Regulation benötigt die Serin-/ Threonin-Kinase Sck2 und beeinflusst die chronologische Alterung in S. pombe. Basierend auf diesen Befunden, werden wir in diesem Projekt die nährstoff-bedingte Induktion der Pmt1-Aktivität weiter untersuchen sowie andere Konditionen suchen, die zur Aktivierung führen. Wir werden die Rolle von Sck2 und anderen Signal-Transduktions-Wegen sowie eine mögliche Rolle von direkter oder indirekter Phosphorylierung und von Interaktionspartnern von Pmt1 untersuchen. Des Weiteren werden wir den Effekt von Pmt1 auf Alterung mit anderen Alterungsgenen in Relation setzen. Basierend auf unseren Erkenntnissen aus der ersten Projektphase werden wir nach Faktoren suchen, die in Abwesenheit von Pmt1 letal wirken, um Aufschluss über die Funktion von Pmt1 zu bekommen. Wir werden die Rolle von Pmt1 in epigenetischem Silencing aufgrund unserer Erkenntnisse der Nährstoff-Abhängigkeit der Pmt1 Aktivität neu evaluieren.